和肌鈣蛋白T醫學檢查(包括:檢查名稱、分類、化驗取材、原理、試劑、操作方法、正常值、化驗結果意義、相關疾病等幾部分。">

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血清肌鈣蛋白I和肌鈣蛋白T

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1 拼音

xuè qīng jī gài dàn bái Ihé jī gài dàn bái T

2 英文參考

Serum troponin I and troponin T

3 概述

肌鈣蛋白肌肉收縮的調節蛋白,由三個結構不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(TnT)、肌鈣蛋白I(TnI)和肌鈣蛋白C(TnC),它附在收縮的橫紋肌細微組織上,TnI是一種結構蛋白,它與肌動蛋白原肌球蛋白互相作用。TnI與肌動球蛋白在靜止狀態時相結合,抑制肌動球蛋白的ATP酶(ATPase)活性。TnC有四個能結合鈣離子的結合點,當它與細胞內的鈣離子結合時,能導致整個肌鈣蛋白構造上的變化。肌鈣蛋白放松了肌動球蛋白,讓肌動球蛋白與肌漿球蛋白互起作用,而造成肌肉收縮。肌鈣蛋白具有的3種同分異構體,其中兩種同分異構體是骨骼肌所特有的,一種同分異構體是心肌所特有的,這3種肌鈣蛋白的同分異構體存在著結構上的差異。心肌中的T和I亞基結構不同于其他肌肉組織,心肌鈣蛋白T、I(CTnT、CTnI)由于分子量小,分別為37000D和24000D,所以發病后血中濃度迅速升高,目前已得到抗CTnT和CTnI的特異抗血清,應用免疫層析與酶免技術可進行快速檢測與定量測定,具有快速、靈敏、特異等特點。

4 血清肌鈣蛋白I和肌鈣蛋白T的別名

TnI;TnT

5 血清肌鈣蛋白I(TnI)和肌鈣蛋白T(TnT)醫學檢查

5.1 檢查名稱

血清肌鈣蛋白I和肌鈣蛋白T

5.2 分類

血液生化檢查 > 蛋白質測定

5.3 化驗取材

血液

5.4 原理

(1)心肌鈣蛋白T、I的快速檢測:應用免疫層析方法測定樣品中的特異抗原(CTnT、CTnI)。測試時滴加血清樣品于樣品槽,樣品通過毛細管效應沿試紙膜運動,如果樣品中含有特異抗原,試驗部位就出現色帶,在對照區域內應該有另一顏色條帶作為實驗對照。

(2)心肌鈣蛋白T的ELISA法測定:生物素與親和素作用下的雙抗體夾心ELISA,用鏈霉親和素-生物素化的抗TnT單克隆抗體包被物,依次于樣品中TnT抗原和酶標TnT單克隆的抗體反應然后加入底物色原。酶催化底物顯色,由系列TnT標準制定的標準曲線,定量測定CTnT含量。

5.5 試劑

(1)心肌鈣蛋白T、I的快速檢測:CTnT免疫層析試紙條(德國寶靈曼公司專利)。

CTnI免疫層析試紙條(進口)。

(2)心肌鈣蛋白T的ELISA法測定:

①生物素-親和素CTnT單克隆抗體包被板。

②孵育緩沖液

③濃縮洗滌液。

④酶標結合物。

⑤CTnT標準品

⑥底物色原:ABTS(二氨2,2疊氮)。

5.6 操作方法

(1)心肌鈣蛋白T、I的快速檢測:

①將包裝紙打開,標記上樣品編號。

②加5~6滴血清樣品到樣品槽中。

③在10~15min內觀察色帶出現情況。

附注:

①試紙條只能用1次,重復使用無效。

②試紙條試驗區和對照區均不出現色帶,取另一試紙條重復檢測仍無結果,則表示試紙條失效。

③免疫層析技術測定CTnT、CTnI適合床邊快速試驗,但只是定性或半定量,要真正了解病情嚴重程度及選擇治療措施還需定量測定。

(2)心肌鈣蛋白T的ELISA法測定:

①在包被板中分別加入標準血清,對照血清和病人標本于相應的孔內各50μl。

②每孔各加孵育緩沖液50μl,并輕輕混勻。

③室溫下孵育60min后洗滌三次,10min內完成。在吸水紙上用力拍打微孔。以除去殘留水滴。

④每孔各加入酶結合物100μl,輕輕混勻。

⑤倒空微孔板中的孵育液,用洗滌液將微孔洗三次,在吸水紙上用力拍打微孔,以除去殘留水滴。

⑥將200μl色原底物溶液加入相應的孔中,避光,輕輕混勻,靜置30min。

⑦用酶標儀在10min內,于405nm和630nm雙波長下測定吸光度值(OD值)。

附注:

①CTnT待測標本最好用血清,不要用抗凝血漿,因為抗凝劑如:肝素、EDTA等對CTnT有影響。

②由于CTnT是心肌細胞損傷釋放出來的,所以盡量避免標本溶血,如果標本溶血很可能造成檢測結果增高。

③配制好孵育液不要冷凍保存,應放在2~8℃冷藏。

④實驗前應注意試劑有無失效,如變質,其顏色加深。

⑤為了提高CTnT檢測的可靠性,應注意加樣的準確及其他操作過程,比色最好選用雙波長。

5.7 正常值

干片法:TnI陰性 免疫法:TnT0~0.15μg/L 。

5.8 化驗結果意義

升高:心肌缺血損傷,如心肌梗死、急性心絞痛不穩定型心絞痛心臟手術后等。心肌損傷后、血中出現TnI、TnT時間最早、持續時間長,因此TnI、TnT是心肌損傷的一個較特異和較靈敏的指標,TnI較TnT更敏感

(1)急性心肌梗死AMI),發病后血中濃度很快增高,GTnT、CTnI,3~6h超過參考值上限值,GTnT 10~24h達峰值,10~15天恢復正常。CTnI 14~20h達峰值,5~7天恢復正常。即出現早,和CK-MB相當或稍早;消失慢,持續時間超過LD1,診斷的窗口期特別長,兼有CK-MB和LD1的優點。靈敏度GTnT為50%~59%(0~6h),CTnI為6%~44%;特異性GTnT為74%~96%,CTnI為93%~99%。據報道GTnT在診斷AMI時比CK-MB更為靈敏,但有報道在腎臟疾病病人血樣中發現GTnT,所以特異性較差。GTnT比LD1/LD2比率在診斷AMI中更為靈敏,且在腎病及其他疾病患者血液中未發現CTnI,所以CTnI是心臟受損時唯一的特異性標志物。由于GTnT和CTnI消失慢,所以,可作為心肌梗死后期標志物。

(2)GTnT和CTnI可作為心臟手術中心肌梗死癥狀出現的指示物,當病人接受動脈搭橋手術時,若GTnT和CTnI含量增加,表明出現心肌梗死,而此時CK-MB含量并無變化。

5.9 相關疾病

急性心肌梗死

相關文獻

開放分類:化驗及醫學檢查
參與討論
  • 評論總管
    2019/7/2 17:49:43 | #0
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本頁最后修訂于 2013年2月24日 星期日 10:52:12 (GMT+08:00)
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